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熒光觀察所需的設(shè)備

隨著生命科學(xué)研究的進(jìn)步,用于觀察處于生命狀態(tài)的細(xì)胞和蛋白質(zhì)的技術(shù)也得到了發(fā)展。熒光觀察在此過(guò)程中發(fā)揮了重要作用。
該技術(shù)使用熒光染料或蛋白質(zhì)作為標(biāo)記來(lái)強(qiáng)調(diào)和投射目標(biāo)區(qū)域。在特定的光(激發(fā)光)發(fā)射到物質(zhì)的分子后,光能被吸收,其中的電子被激發(fā)。然后,在返回基態(tài)的過(guò)程中發(fā)出稱為熒光的光。

利用這種激發(fā)電子的現(xiàn)象,熒光顯微鏡在其他設(shè)備中使用光源,物鏡和熒光濾光片以使特定波長(zhǎng)的光通過(guò)。

選擇合適的熒光濾光片對(duì)于獲得更好的圖像很重要。濾光片由激發(fā)濾光片和來(lái)自光源的特定波長(zhǎng)的光通過(guò),該發(fā)射濾光片使樣品發(fā)出的熒光通過(guò)。還包括分色鏡以反射特定波長(zhǎng)的光并使不同波長(zhǎng)的光通過(guò)以將激發(fā)光與熒光分離。
zui近,每個(gè)制造商都根據(jù)熒光試劑的特性提供了熒光濾光片組(熒光濾光片立方體),因此用戶可以根據(jù)其標(biāo)本選擇合適的組合。

選擇熒光濾光片的要點(diǎn)

在選擇熒光濾光片組(熒光濾光片立方體)時(shí),用戶必須使熒光染料的特性與該激發(fā)和發(fā)射濾光片的波長(zhǎng)范圍緊密匹配。每個(gè)過(guò)濾器的特征如下:

  • -勵(lì)磁過(guò)濾器

  • 根據(jù)要支持的光的波長(zhǎng)帶的寬度,有窄帶和寬帶濾波器?;旧?,頻帶越寬,您可以獲得的圖像越明亮。但是,通常使用窄帶濾波器來(lái)減少對(duì)活體樣品的損害。

     

  • -排放過(guò)濾器

  • 這類濾波器大致分為長(zhǎng)通(LP)濾波器,短通(SP)和帶通(BP)濾波器。LP濾鏡僅透射比特定波長(zhǎng)更長(zhǎng)的波長(zhǎng),而SP濾鏡僅透射比特定波長(zhǎng)短的波長(zhǎng)。BP濾鏡僅透射特定波長(zhǎng)帶中的光。
    當(dāng)使用單一熒光試劑時(shí),可以通過(guò)使用LP濾鏡獲得更明亮的圖像。另一方面,當(dāng)使用幾種熒光染料時(shí),可以通過(guò)使用不同的BP濾鏡獲得每種熒光染料的圖像。

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